2024-12-09 02:53:12
《〈pcr最新技术原理方法及应用(第三版)〉简介》
《pcr最新技术原理方法及应用(第三版)》是一本极具价值的书籍。
**一、原理**
pcr即聚合酶链式反应,其原理基于dna的半保留复制。通过高温变性使双链dna解旋为单链,然后降温让引物与模板链特异性结合,再由耐高温的dna聚合酶在合适温度下延伸引物,如此循环多次,实现特定dna片段的大量扩增。
**二、方法**
书中详细介绍了传统pcr的操作流程,包括样本处理、试剂准备、反应体系设置等,还涵盖了新型的pcr技术,如实时荧光定量pcr等的特殊操作要点。
**三、应用**
在医学领域可用于疾病诊断、病原体检测;在生物技术方面,用于基因克隆和测序;在法医学上可进行个体识别等,对众多学科的发展有着深远意义。
pcr技术理论基础
《pcr技术的理论基础》
pcr(聚合酶链式反应)技术的理论基础源于dna的半保留复制特性。dna在生物体内复制时,双链解开后分别作为模板,按照碱基互补配对原则合成新的互补链。
在pcr中,首先高温使待扩增的dna双链解开成为单链模板。然后降低温度,引物与单链模板上的特定互补序列结合。之后,在适宜温度下,dna聚合酶以引物为起始点,利用四种脱氧核苷酸为原料,沿着模板链延伸合成新的dna链。这样经过多个循环,每一轮循环都会使目的dna片段数量加倍,从而实现对特定dna片段的大量扩增,这一技术在分子生物学研究、疾病诊断、法医鉴定等众多领域有着广泛的应用。
易错pcr技术原理及步骤
《
易错pcr技术原理及步骤》
**一、原理**
易错pcr是一种在pcr反应中引入随机突变的技术。通过改变pcr反应条件,如调整镁离子浓度、使用低保真度的dna聚合酶等,使dna聚合酶在合成新链时增加碱基错配的概率,从而在扩增的dna片段中产生随机突变。这些突变可以改变基因的编码序列,为研究基因功能、筛选具有新特性的蛋白质等提供丰富的突变体资源。
**二、步骤**
1. 设计引物:针对目标dna序列设计特异性引物。
2. 准备反应体系:加入模板dna、dntp、缓冲液、改变后的镁离子和低保真度dna聚合酶等。
3. 进行pcr反应:经过变性、退火和延伸的多轮循环,在循环过程中由于条件影响产生随机突变。
4. 产物分析:对易错pcr产物进行测序等分析,确定突变情况。
# 《
pcr技术原理ppt文章》
pcr(聚合酶链式反应)是一种用于放大扩增特定的dna片段的分子生物学技术。
**一、基本原理**
1. **变性**
- 高温(一般90 - 95℃)使双链dna解旋为单链,这一步破坏了dna双链间的氢键,使得后续反应能以单链dna为模板。
2. **退火**
- 降低温度(约50 - 65℃),引物与单链dna模板上的互补序列结合。引物是人工合成的短链dna片段,能特异性地识别目标序列的起始部位。
3. **延伸**
- 在适宜温度(70 - 75℃)下,dna聚合酶以dntp为原料,从引物的3'端开始,按照碱基互补配对原则合成新的dna链。经过多次循环,目标dna片段数量呈指数增长,从而实现对特定dna片段的大量扩增,这在基因检测、克隆等众多领域有着广泛应用。